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采用PNP比色法,其檢測原理是Para-nitrophenyl phosphate (pNPP)為一種常用的磷酸酶顯色底物,在酸性條件下,以AMP為磷酸?;氖荏w物質,可在堿性磷酸酶的作用下生成p-nitrophenol。在堿性條件下p-nitrophenol轉變成醌式結構,呈較深的黃色,產物黃色越深,說明堿性磷酸酶活性越高,反之則酶活性越低,通過酶標儀測定400~415nm處吸光度