產(chǎn)品介紹

     為重組 E. coli 菌株，其基因組中含有來(lái)源于 Thermusaquaticus YTI 中克隆的 Taq DNA polymerase 基因。本產(chǎn)品是一種熱穩(wěn)定性酶，分子量大約為 94kDa。它與天然 Tag DNA 聚合酶有相同的功能。在 Mg 2+存在的條件下可催化核苷酸沿 5’→3’方向發(fā)生聚合反應(yīng)，形成雙鏈 DNA；同時(shí)它還具有 5’ →3’外切酶活性。

    使用本品擴(kuò)增得到的 PCR 產(chǎn)物的 3´端附有一個(gè)"A"堿基，因此可直接克隆于 T-Vector 中。

活性定義：在 74℃條件下，30 分鐘內(nèi)催化 10nmol 的 dNTP 摻入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定義為一個(gè)活性單位。

貯存條件： 20 mM Tris-HC（l pH 8.0，25℃），100 mM KCl，0.1 mM EDTA，1 mM DTT，0.5% NP-40 ，0.5% Tween -20 ，50%Glycerol 

反應(yīng)條件： 50mM KCl， 10 mM Tris-HCl (Ph8.6，25℃)， 0.1% Triton X-100 ，1.5mM MgCl2. 

質(zhì)量保證：本品經(jīng) PCR 驗(yàn)證，活性測(cè)定，內(nèi)切核酸酶/缺刻酶測(cè)定和 SDS-PAGE 純度鑒定。保證產(chǎn)品的質(zhì)量穩(wěn)定可靠。

使用注意：除了酶活性喪失外，下列因素也可能導(dǎo)致擴(kuò)增失敗

（1）模板太多或太少；（2）樣品中存在 Mg 2+ 絡(luò)合劑，導(dǎo)致 Mg 2+實(shí)際濃度過(guò)低；(3) PCR 儀溫度不準(zhǔn)； (4) 臨床來(lái)源的樣品中含有未知的 Taq 酶抑制劑； (5) 引物部分降解；(6) dNTP 部分降解；(7) Taq 酶用量太大等。

 建議：每 50 微升反應(yīng)體系中，酶用量為 0.5-1 微升最好，酶量少可能擴(kuò)增效率低下，使用時(shí)請(qǐng)注意! 

用途： 

 1) 常規(guī) PCR 鑒定。

 2) 小片段目標(biāo)基因克?。ㄍ扑]小于 500bp）。

 3) 標(biāo)記 DNA 3’-末端。

 4) 平端 PCR 產(chǎn)物加“A”。